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外泌體是什么？外泌體(Exosome)研究正確打開方式
外泌體曾經被認為是細胞卸載廢物的一種方式，在過去的十年中，我們對外泌體的看法發生了巨大變化。我們已經開始認識到，外泌體是從細胞中釋放出來的，通過其RNA，蛋白質，脂質和DNA的載體充當信號載體和組織重塑者。參與癌癥，炎癥，免疫，中樞神經系統功能，心臟細胞功能。
外泌體在這些基本生物過程中的作用，它們作為生物標志物，也可作為靶向遞送生物分子藥物載體（如治療）的工具研究。獲取和研究外泌體所需的一切，從分離和鑒定分析以及染色等。基于qPCR的外泌體miRNA分析還是RNA-Seq方法，我們都有高質量的外泌體研究產品來支持您的科學研究并推進您的工作。
外泌體是什么
外泌體(Exosome)是由細胞內多泡體與細胞膜合后，釋放到細胞外的一種直徑約30-150nm的膜性囊泡，區別于微囊泡（100-1000nm),凋亡小體（400-4000nm）。
目前學術界主流觀點認為外泌體的產生過程為:組物膜內陷形成內體(endosome)。再形成多囊泡體(mutivesicutar bodesMVB)，最后分泌到細胞外成為外泌體。
性質分類 | 外泌體Exosomes | 微囊泡 Microvesicles | 凋亡小體Apoptotic Bodies |
直徑 | 30-150nm | 100-1000nm | 400-4000nm |
密度(g/mL) | 1.10-1.18 | 1.02-1.22 | 1.16-1.28 |
蛋白標記物 | Alix、TSG101、HSC70、 CD63、CD81、CD9 | Selectin、integrins、 CD40、MMP | Histones |
來源 | 細胞內的多泡小體與細胞膜融合后，其內的小泡釋放到細胞外 | 細胞膜出芽形成 | 凋亡時細胞膜皺縮內 陷，分割包裹胞質形 成的泡狀小體 |
攜帶遺傳信息 | mRNA、miRNA、DNA | mRNA、miRNA、DNA | mRNA、miRNA、DNA |
功能 | 胞內信息傳遞，胞外物質交換 | 胞內信息傳遞，胞間遺傳物質運輸 | 調理病理學及生理發生過程 |
外泌體發現歷程
外泌體的功能
細胞增值與凋亡調控，轉移與侵襲，血管生成，免疫應答，細胞分化，代謝調控，微生物組調控，病毒感染。
外泌體研究應用
1、載體藥物研究：外泌體可作為載體將包裹在內的藥物運送到目標區域，做到靶向治療；
2、診斷研究：主要研究外泌體的種類、數目、大小和內容物與疾病之間的關系；來預測疾 病的發生與進展（如阿爾茨海默病）；
3、間充質干細胞外泌體改造：間充質干細胞來源外泌體與間充質干細胞有著相似的功能， 間充質干細胞來源外泌體更穩定，更好保存，易于管理和控制，可以人為改變其內容物 的種類和數量。
4、外泌體biomarker:外泌體內容物分析轉錄組測序、芯片（mRNA,LncRNA,miRNA,cir RNA)、蛋白質組、代謝組分析。
外泌體提取方法
翌圣生物經過研發，開發出*的分離技術，可以快速從各種樣本中如血漿/血清，細胞培養上清，尿液，乳液，腹水，羊水，唾液等其他體液中獲得大量完整的外泌體，適用于下游共培養，電鏡分析和高通量測序等實驗。
外泌體的科研思路
對外泌體進行提取以后，通常對外泌體進行鑒定，方法為：NTA粒徑分析、電鏡掃描和Western Blot，WB中的常見指標有CD9, CD63, CD81、TSG101，后續科研思路比較廣泛，其中外泌體內含RNA表達譜研究二代測序的研究是熱門的科學研究方向，下圖為常見的科研思路的整理圖：
外泌體的鑒定
外泌體形成和釋放后，會形成自身*的標志性蛋白，利用Western blot對這些標志蛋白進行檢測，可以對外泌體進行鑒定。翌圣外泌體鑒定試劑盒針對外泌體標志蛋白CD63和TSG101開發，適用于人、大鼠、小鼠外泌體的鑒定。
實驗方法：
SDS-PAGE膠：10%分離膠；
樣品上樣量：10μg；
一抗：Anti-CD63抗體，1:2000稀釋；Anti-TSG101抗體，1:1000稀釋；4℃孵育過夜；
二抗：Anti-mouse IgG，arigo ARG65350，1:10000稀釋，室溫孵育50min；
曝光時間：5s。
外泌體高通量測序
外泌體參與多種生理或病理過程，如抗原呈遞、RNA轉運、組織修復、神經退行性疾病、腫瘤轉移、代謝重建等。外泌體中含有細胞特異核酸和蛋白可以作為疾病的早期分子診斷標志物，通過對外泌體內RNA的測序分析進行疾病鑒定和外泌體功能分析。翌圣生物建庫試劑盒，適合外泌體RNA高通量測序，低樣本高收獲。
優質的低樣本量RNA建庫質量
圖1:不同DV200 Human FFPE RNA的500ng投入量建庫，Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit for Illumina® 相比于競品N* ，文庫大小一致，1st cDNA 合成效率更高。
圖2：Hieff NGS® Ultima Dual-mode RNA Library Prep Kit for Illumina®相比于競品N*，數據產出相關性高，數據均一性更好。
產品分類 | 產品名稱 | 貨號 |
外泌體提取試劑盒 | Hieff® Quick exosome isolation kit（for Cell Culture Media）細胞培養上清外泌體快速抽提試劑盒★ | 41201ES |
Hieff® Quick exosome isolation kit（for Serum/Plasma）血清/血漿外泌體快速抽提試劑盒★ | 41202ES | |
Hieff® Quick exosome isolation kit（for Body Fluids）體液外泌體快速抽提試劑盒★ | 41204ES | |
Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Cell Culture Media) 細胞培養上清外泌體快速抽提試劑盒Plus★ | 41205ES | |
Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Serum/Plasma) 血清/血漿外泌體快速抽提試劑盒Plus★ | 41206ES | |
Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Urine) 尿液外泌體快速抽提試劑盒Plus★ | 41207ES | |
Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Body Fluids) 體液外泌體快速抽提試劑盒Plus★ | 41208ES | |
Hieff® Quick exosome isolation kit Plus (for Milk) 乳液外泌體快速抽提試劑盒Plus | 41209ES | |
外泌體鑒定試劑盒 | Hieff® Exosome identification kit for Westernblot外泌體鑒定試劑盒★ | 41203ES |
外泌體專用血清培養基 | Hieff® Serum-free medium (for exosome) 外泌體專用無血清培養基 | 41210ES |
外泌體示蹤 | DiI (DiIC18(3)) 細胞膜橙紅色熒光探針 | 40726ES |
DiO (DiOC18(3)) 細胞膜綠色熒光探針★ | 40725ES | |
DiR Iodide (DiIC18(7)) 細胞膜深紅色熒光探針★ | 40757ES | |
DiD Perchlorate (DiIC18(5)) 細胞膜紅色熒光探針★ | 40758ES | |
DiIC16(3) perchlorate 細胞膜橙紅色熒光探針★ | 40772ES | |
Celltracker CM-DiI 活細胞示蹤劑CM-DiI （紅色）★ | 40718ES | |
外泌體抑制劑 | GW 4869 (hydrochloride hydrate)外泌體抑制劑 | 52321ES |
RNA建庫試劑盒 | Hieff NGS® Ultima Dual-Mode RNA Library Prep Kit for Illumina★ | 12252ES |
Hieff NGS® Ultima Dual-Mode RNA Library Prep Kit for MGI®★ | 13333ES |
