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鏈霉親和素純化介質——一品多用,使用靈活,你get到了嗎?

2022-4-25  閱讀(720)

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鏈霉親和素純化介質——一品多用,使用靈活,你get到了嗎?




產品簡介


                    

鏈霉親和素(Streptavidin)是一種由同一亞基組成的四聚體蛋白。每個亞基與一個生物素分子結合,具有高度的親和力和特異性。蛋白或者抗體一旦生物素化,便可以結合在鏈霉親和素修飾的固相基底,如磁性材料或者是瓊脂糖上,進行免疫共沉淀,結合在樹脂柱或者平板表面用作ELISA。

Streptavidin Agarose Resin 6FF將鏈霉親和素固定在高度交聯(lián)的6%瓊脂糖表面,主要用來純化亞氨基生物素或Strep標記的蛋白、抗體、核酸等物質,或者是固定生物素化蛋白后分離其他蛋白,如免疫沉淀。

1.png 

 



產品特性



表1 Streptavidin Agarose Resin 6FF親和介質產品特性

參數(shù)

指標

基質(Matrix)

高度交聯(lián)的6%瓊脂糖微球

配體(Ligand)

鏈霉親和素

粒徑(Bead size)

45-165 µm

載量(Capacity)

>200 nmol   Biotin/mL介質

最大壓力(PressureMax)

0.3 MPa,3 bar

pH穩(wěn)定范圍(pH   range)

2-10

 



產品優(yōu)勢



1、直接快速分何生物素化分子,應用廣泛,使用靈活。

2、專一性高,非特異性干擾少,結合穩(wěn)定。

3、純化樹脂材質穩(wěn)定。

4、結合容量高。

5、Streptavidin Agarose Resin 6FF可特異性結合多種標簽,如下表所示。

表2 鏈霉親和素可特異性結合的標簽

名稱

結合能力

蛋白純化洗脫條件

推薦應用

生物素

強力變性緩沖液

固定生物素化抗體純化抗原,或固定生物素化蛋白來分離其他蛋白,如免疫沉淀

2-亞氨基生物素

較強

酸性pH=4

純化帶此標簽的蛋白,可重復使用。

可斷裂的生物素化試劑

還原條件下

純化帶此標簽的蛋白

Strep-tag II

用生物素競爭洗脫

純化帶此標簽的蛋白

Twin-Strep-tag

較弱

用生物素競爭洗脫

純化帶此標簽的蛋白

 



純化步驟



 1、平衡,使填料處于和樣品一樣的緩沖環(huán)境

 2、上樣,通過重力將樣品上樣至色譜柱結合

 3、洗雜,除去非特異性結合的雜蛋白

 4、洗脫,將結合的目的蛋白從填料上洗脫

 2.png

 



測試結果


圖片1.png

Streptavidin Agarose Resin 6FF純化亞氨基生物素標簽蛋白結果電泳圖

1650503821775654.png

Streptavidin Agarose Resin 6FF純化Twin-Strep-tag標簽蛋白結果電泳圖




常見問題



問題

可能原因

推薦解決方案

柱子反壓過高

填料被堵塞

清洗樹脂。

裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上樣前最好用0.22 µm或0.45 µm濾膜過濾,或離心去除。

樣品太黏稠

樣品中含高濃度的核酸,延長破碎時間直至粘度降低,或添加DNaseI (終濃度為5µg/ml),Mg2+(終濃度1mM),冰上孵育10-15min

緩沖液太黏稠

有機試劑或蛋白穩(wěn)定試劑(如甘油等)可能會引起反壓增高,降低操作流速。

洗脫組分中無目的蛋白

過度的裂解使目的蛋白變性

使用溫和的裂解條件,實驗條件以經驗為準。

目的蛋白聚集產生沉淀

在細胞裂解前溶液中加入DTT,終濃度為1-10 mM

目的蛋白沒有*洗脫下來

洗脫體積太少

增加洗脫液體積,減小洗脫流速。

洗脫液中鹽酸胍的pH 發(fā)生改變

使用新鮮配制的洗脫液

洗脫液孵育時間不夠

增加洗脫液與凝膠的孵育時間

 


產品信息



產品名稱

產品編號

規(guī)格

價格(元)

Streptavidin Agarose Resin 6FF?鏈霉親和素瓊脂糖純化樹脂

20512ES08

5 mL

1586.00

20512ES25

5 mL×5

6356.00

20512ES60

100 mL

16796.00

BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 1ML?生物素分子純化預裝柱,1ML

20513ES03

1 mL

428.00

20513ES08

1 mL×5

1328.00

BiotSep Streptavidin 6FF Chromatography Column, 5ML?生物素分子純化預裝柱,5ML

20514ES08

5 mL

1158.00

20514ES25

5 mL×5

4958.00

 


相關產品


產品名稱

產品編號

規(guī)格

價格(元)

Streptavidin (SAV) MagBeads 鏈霉親和素(SAV)免疫磁珠

47503ES03

1 mL

728.00

 

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