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利用RNA體外合成(IVT)技術制備的mRNA疫苗在傳染病的防治上產生了巨大的影響,無論是其開發生產周期以及疫苗的安全、高效性都明顯優于傳統疫苗,因此具有極大的發展潛力。
▲ 圖1.疫苗接種圖(攝圖網)
mRNA疫苗主要是體外合成RNA,是以DNA為模板通過體外轉錄得到,常用的是以線性化質粒DNA或PCR擴增產物為模板利用RNA聚合酶在體外轉錄合成再進行修飾獲得。是利用含有T7啟動子(TAATACGACTCACTATAGGG)或SP6啟動子(ATTTAGGTGACACTATAG)序列的DNA為模板在含有T7或SP6 RNA聚合酶的條件下,以NTP為底物合成與模板DNA中一條鏈互補的mRNA,簡單快速獲得大量的mRNA分子,通過在5’端加上帽子結構和3’端加ployA尾加強mRNA的穩定性。
▲ 圖2.體外轉錄(IVT)mRNA生產和裝配過程[1]
體外合成RNA應用方向
體外合成RNA常見問題和困惑
T7Kit測試數據


<不同長度rna轉錄>
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參考文獻