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上海起發haemtech熒光底物說明書

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熒光底物

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基于 ANSN 的熒光底物
的一般結構圖解了基于6-氨基-1-萘酰胺 (ANSN) 熒光底的一般結構。在本化合物家族中,R 1 是三肽,其COOH-末端殘基通常是精氨酸。R2和R3可以是氫、烷基、芳基或環烷基。虛線表示各種絲氨酸蛋白酶水解的位點。

含有熒光報告基團 6-amino-1-naphthalene-sulfonamide (ANSN) 的底物是用于監測各種絲氨酸蛋白酶的酶活性的有用化合物 (1-12)。在此類化合物中,ANSN 報告基團與短的三肽序列相連(在 R1 位置)。肽序列旨在優化酶和底物之間的相互作用。可以添加到 R2 和 R3 位置的其他成分反映了 P' 亞位點位置的變化,并且通常會影響底物的動力學參數。作為有效底物的化合物在三肽和 ANSN 基團之間水解。一旦從肽部分切下,ANSN 基團的相對熒光就會增加約 1000 倍。

下頁確定的動力學特性將有助于選擇合適的底物。已證明 ANSN 底物對因子 VIIa (1-5,7,9,10,12) 的分析特別有用。盡管單獨的因子 VIIa 的底物水解速率相對較慢,但當組織因子加入分析系統時,幾種化合物(例如化合物 SN-17a)的 kcat 會發生很大變化。

使用信息:
基于 ANSN 的底物以 DMSO 中的 10mM 儲備溶液形式提供,通??捎糜诜治?400 nM 至低至 50pM 濃度范圍內的酶。ANSN 底物通常以 50 到 100 µM 的最終濃度使用,并且可以在大多數生理緩沖液(即 TBS、HBS、PBS 等)中稀釋到該最終濃度。反應(熒光的相對變化)可以使用標準熒光計或熒光讀板器進行監測。動力學或終點模式可與設置在以下波長(激發=352nm,發射=470nm)的儀器一起使用。通過在發射光束中使用 390 至 450 nm 長通截止濾波器,可以最大限度地減少光偽影。

下表列出了每種底物的動力學特性,表下方列出了期刊參考文獻列表作為使用示例。

DMSO 中的儲備底物溶液應在 4°C 或更低的溫度下冷凍儲存,并應避光。在這些條件下,化合物將保持穩定超過一年。

 

上海起發haemtech熒光底物說明書

貨號品名規格價格品牌
SN-56-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substrate1mg1700haemtech2021
SN-76-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substrate1mg1700haemtech2021
SN-13a6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substrate1mg1700haemtech2021
SN-17a6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substrate1mg1700haemtech2021
SN-17c6-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substrate1mg1700haemtech2021
SN-186-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substrate1mg1700haemtech2021
SN-206-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substrate1mg1700haemtech2021
SN-546-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substrate1mg1700haemtech2021
SN-596-amino-1-naphthalenesulfonamide-based (ANSN) fluorogenic substrate1mg1700haemtech2021

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