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3148次NittoPhase®HL固相載體使用指南
NittoPhase®HL Solid Support是一種優化設計的支持藥物級寡核苷酸高效合成的支持物。交聯聚苯乙烯樹脂具有高產率獲得高質量寡核苷酸所需的幾種*性能,超過了市場上可用的各種其他支持的性能。已證明該支持可在小規模和大規模合成以及各種合成儀(包括OligoProcess™)中有效執行。
層析柱填充建議
(a) 固定床柱
注意:為避免合成儀的潛在機械問題,使用NittoPhase®HL干粉填充合成柱,僅使用規定體積的推薦量。
1. 選擇具有所需裝載物的NittoPhase®HL Solid Support。
2. 數量 of NittoPhase®HLSolid 支持 在6.3 mL色譜柱中有效合成所需的量見下表。*
3. 使用下表中推薦用于合成的載體量,用干燥載體填充不銹鋼色譜柱,連接色譜柱并啟動合成程序。
表1. NittoPhase®HL固相載體裝量建議。* | ||
RNA合成 | 上樣量(µmol/g) | 裝量(6.3 mL層析柱) |
| 150 | 0.79 g |
21聚體 | 200 | 0.74 g |
| 250 | 0.69 g |
DNA合成 | 上樣量(µmol/g) | 裝量(6.3 mL層析柱) |
| 300 | 0.83 g |
20聚體 | 350 | 0.80 g |
| 400 | 0.77 g |
*對于其他尺寸的色譜柱,所需的裝量與上文所列體積相比呈線性變化。色譜柱填充體積可能因寡核苷酸的長度和修飾而異。
(b) 可調列
1. 確定合成的規模。
2. 根據支承載荷計算所需NittoPhase®HL固相支承的量:
支撐物用量[g]= 規模[µmol]÷支撐物上樣量[µmol/g]
3. 使用以下公式計算柱體積(CV):
CV[mL]= 支持量[g]÷0.109**
4. 使用以下公式計算柱高h:
h[cm]= 4 CV[mL]÷πd2 d為色譜柱直徑(cm)
5. 將支架轉移至色譜柱中,將活塞牢固調整至高度h。
6. 開始合成。
(c) 合成操作
1. 標準合成程序將適用于NittoPhase®HL Solid Support。
2. 合成完成后,使用標準去保護程序。用乙醇/水(1:1,v/v)沖洗載體以*回收。
3. 對于UnyLinker NittoPhase®HL,在55 ℃濃縮氫氧化銨中脫保護9-11小時足以進行UnyLinker裂解。
**基于250µmol/g的21聚體RNA。色譜柱填充量可能因寡核苷酸的長度和修飾而異。
NittoPhase®是Nitto Denko Corporation的商標。©2015 Kinovate Life Sciences Inc.版權所有。保留所有權利。本文提及的商標歸Kinovate Life Sciences Inc.或其各自所有者所有。在美國印刷。KLS F005 0415
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