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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

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omegabiotek M3298-01說(shuō)明書(shū)

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omegabiotek M3298-01說(shuō)明書(shū)

 

Mag-Bind®cfDNA試劑盒

使用磁珠從血漿或血清中分離循環(huán)的無(wú)細(xì)胞DNA。

SKU:M3298-01

類(lèi)別:循環(huán)DNA

標(biāo)簽:cfDNA,M3298-00,M3298-01,M3298-02,NIPT

概觀

Mag-Bind®cfDNA試劑盒專(zhuān)為從500-8,000μL血漿或血清樣品中快速可靠地分離循環(huán)DNA而設(shè)計(jì)。Mag-Bind®cfDNA試劑盒可以手動(dòng)或在自動(dòng)化平臺(tái)上進(jìn)行處理。該程序消除了對(duì)漏斗和真空步驟的需要,在自動(dòng)化協(xié)議中提供免提操作。

*配方的結(jié)合緩沖液允許以自動(dòng)化形式處理大量樣品,允許在24孔板形式的單個(gè)孔中處理4mL血清或血漿。Mag-Bind®顆粒CH的磁響應(yīng)允許在需要大體積的步驟中快速磁化,并且高結(jié)合容量允許減少所需的磁性顆粒量,從而將4mL血清或血漿樣品的洗脫體積降低至50μL 。

Mag-Bind®cfDNA試劑盒也已自動(dòng)化,可在Hamilton平臺(tái)上處理8 mL樣品。請(qǐng)聯(lián)系我們獲取自動(dòng)化支持。

協(xié)議適用于以下自動(dòng)化平臺(tái):

  • HamiltonMicrolab®STAR
  • HamiltonMicrolab®NIMBUS
  • KingFisher™,BioSprint®和MagMAX®96

產(chǎn)品規(guī)格

僅供研究使用。不用于診斷過(guò)程。

特征產(chǎn)品規(guī)格
樣品類(lèi)型血漿/血清
樣本量500-8000μL
技術(shù)磁珠
處理手動(dòng)或自動(dòng)
自動(dòng)化
處理時(shí)間96(1mL)樣品2小時(shí)
格式管,24孔,96孔
洗脫體積50μL

 

套件組件

Mag-Bind®顆粒CH

DS緩沖區(qū)

JSB緩沖區(qū)

GT7緩沖區(qū)

SPW緩沖區(qū)

洗脫緩沖液

蛋白酶K溶液

產(chǎn)品數(shù)據(jù)

使用Omega Bio-tek的Mag-Bind®cfDNA試劑盒純化的無(wú)細(xì)胞DNA幾乎沒(méi)有基因組DNA物


圖1. 來(lái)自4 mL血清的純化DNA的電泳重疊。使用來(lái)自O(shè)mega Bio-tek和Company Q的試劑盒按照制造商推薦的方案純化4mL未加標(biāo)血清。在Agilent的TapeStation®2200上分析純化的DNA。

使用Omega Bio-tek的Mag-Bind®fCRDNA試劑盒純化的無(wú)細(xì)胞DNA的高質(zhì)量和高產(chǎn)量Mag-Bind®cfDNA試劑盒


圖2. 來(lái)自1 mL血清的純化DNA的電泳覆蓋圖  。將剪切的細(xì)菌DNA摻入血清樣品中并使用Omega Bio-tek的Mag-Bind cfDNA試劑盒和來(lái)自Company Q的基于柱的試劑盒進(jìn)行分離。使用16s細(xì)菌特異性引物以1X和10X稀釋度進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR。在Agilent的TapeStation®2200上分析純化的DNA .Omega Bio-tek試劑盒能夠捕獲沒(méi)有基因組DNA污染的循環(huán)無(wú)細(xì)胞DNA。相反,Company Q的洗脫液含有高分子量片段,表明在循環(huán)DNA分離中存在基因組DNA。

使用Omega Bio-tek的cfDNA試劑盒純化的cfDNA不含PCR抑制劑


表1.  對(duì)從純化的樣品中分離的未稀釋和10倍稀釋的DNA一式三份進(jìn)行具有16S細(xì)菌特異性引物的實(shí)時(shí)PCR [圖2]。數(shù)據(jù)顯示純化的DNA不含PCR抑制劑,并且特定的cfDNA濃度高于公司Q.

使用Mag-Bind®cfDNA試劑盒可以回收小至50 bp的循環(huán)無(wú)細(xì)胞DNA


圖3.  使用修改的方案可以回收小至50bp的DNA片段。加入50bp DNA梯度的血清用Mag-Bind®cfDNA試劑盒純化。通過(guò)使用修改的協(xié)議,回收了較小的片段。

使用Mag-Bind®cfDNA試劑盒分析從8 mL血漿中純化的cfDNA


圖4.1。 使用Mag-Bind®cfDNA試劑盒純化血漿樣品。將純化的DNA樣品加載到TapeStation 2200上的D100高靈敏帶上。


圖4.2。 使用TapeStation軟件分析圖4.1中的凝膠圖像。峰值和濃度數(shù)據(jù)顯示8 mL自動(dòng)化過(guò)程是成功的。


圖4.3。 使用TapeStation軟件分析圖4.1中的凝膠圖像。疊加顯示純化的DNA含有更多的cfDNA和小的基因組DNA污染。


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