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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

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haemtech熒光底物

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haemtech熒光底物

Fluorogenic Substrates

 

基于ANSN的生成基質(zhì)
的一般結(jié)構(gòu)示出了基于6-氨基-1-萘酰胺(ANSN)熒光底的一般結(jié)構(gòu)。在本發(fā)明化合物家族中,R1是三肽,其COOH末端殘基通常是精氨酸。R2和R3可以是氫,烷基,芳基或環(huán)烷基。虛線表示各種絲氨酸蛋白酶的水解位點(diǎn)。

含有熒光報(bào)告基團(tuán)6-氨基-1-萘 - 磺酰胺(ANSN)的底物是用于監(jiān)測(cè)各種絲氨酸蛋白酶(1-12)的酶活性的有用化合物。在這類化合物中,ANSN報(bào)告基團(tuán)與短的三肽序列連接(在R1位置)。設(shè)計(jì)肽序列以優(yōu)化酶和底物之間的相互作用。可以添加到R2和R3位置的附加組分反映P'亞位點(diǎn)位置的變化,并且通常影響底物的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。作為有效底物的化合物在三肽和ANSN基團(tuán)之間水解。一旦從肽部分切割,ANSN組的相對(duì)熒光增加約1000倍。

下頁(yè)中確定的動(dòng)力學(xué)特性將有助于選擇合適的底物。已證明ANSN底物對(duì)因子VIIa(1-5,7,9,10,12)的分析特別有用。盡管單獨(dú)的因子VIIa的底物水解速率相對(duì)較慢,但當(dāng)將組織因子摻入測(cè)定系統(tǒng)時(shí),幾種化合物如化合物SN-17a在kcat中表現(xiàn)出大的變化。

使用信息:
基于ANSN的底物作為DMSO中的10mM儲(chǔ)備溶液提供,并且通常可用于分析濃度范圍為400nM至低至50pM的酶。ANSN底物通常以50至100μM的終濃度使用,并且可以在大多數(shù)生理緩沖液(即TBS,HBS,PBS等)中稀釋至該終濃度。可以使用標(biāo)準(zhǔn)熒光計(jì)或熒光板讀數(shù)器監(jiān)測(cè)反應(yīng)(熒光的相對(duì)變化)。儀器設(shè)置在以下波長(zhǎng)(激發(fā)= 352nm,發(fā)射= 470nm)時(shí)可以使用動(dòng)力學(xué)或終點(diǎn)模式。通過(guò)在發(fā)射光束中采用390至450nm長(zhǎng)通截止濾光器,可以小化光偽影。

每種底物的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)列于下表中,并且在表格下方列出了期刊參考列表以供使用實(shí)例。

DMSO中的儲(chǔ)備底物溶液應(yīng)在4°C或更低溫度下冷凍保存,并應(yīng)避光保存。在這些條件下,化合物將保持穩(wěn)定超過(guò)一年。

 

SN-5 6-氨基-1-萘磺酰胺基(ANSN)熒光底物定價(jià):請(qǐng)咨詢

 安全數(shù)據(jù)表

結(jié)構(gòu)體

D-AFK-ANSNH-iC 4 H 9 .2HBr

對(duì)...有用

對(duì)纖溶酶有用

 

公式

DMSO

濃度

10 mM

 

 

 

動(dòng)力學(xué)特性

IIA

VIIa的

Ⅶa因子/ TF

XA

XIa的

aPC的

tPA的

纖溶酶

M

ND

ND

ND

ND

ND

ND

ND

130

ND

ND

ND

ND

ND

ND

ND

3.7

cat / K M.

ND

ND

ND

ND

ND

ND

ND

0.28

 

 

SN-7 6-氨基-1-萘磺酰胺基(ANSN)熒光底物

結(jié)構(gòu)體

Mes-D-LGR-ANSN(C 2 H 52

對(duì)...有用

對(duì)因子Xa有用

 

公式

DMSO

濃度

10 mM

動(dòng)力學(xué)特性

IIA

VIIa的

Ⅶa因子/ TF

XA

XIa的

aPC的

tPA的

纖溶酶

M

31

180

200

125

580

113

ND

ND

0.63

0.007

0.79

36

15

0.055

ND

ND

cat / K M.

0.2

ND

0.04

2.9

0.26

0.005

ND

ND

 

 

SN-13a 6-氨基-1-萘磺酰胺基(ANSN)熒光底物

結(jié)構(gòu)體

D-LPR-ANSNH-C 3 H 7 • 2HCl

對(duì)...有用

因子XIa有用

 

公式

DMSO

濃度

10 mM

 

動(dòng)力學(xué)特性

IIA

VIIa的

Ⅶa因子/ TF

XA

XIa的

aPC的

tPA的

纖溶酶

M

0.5

300

300

171

75

45

98

ND

19

0.07

4.5

3.3

53

52

0.31

ND

cat / K M.

380

0.002

0.15

0.19

7.1

12

0.03

ND

 

 

SN-17a 6-氨基-1-萘磺酰胺基(ANSN)熒光底物

結(jié)構(gòu)體

D-FPR-ANSNH-C 6 H 11 • 2HCl

對(duì)...有用

對(duì)凝血酶和VIIa有用

 

公式

DMSO

濃度

10 mM

 

動(dòng)力學(xué)特性

IIA

VIIa的

Ⅶa因子/ TF

XA

XIa的

aPC的

tPA的

纖溶酶

M

0.4

150

330

150

ND

7.8

36

ND

17

0.05

8.4

0.32

ND

6.6

0.074

ND

cat / K M.

430

0.004

0.25

0.02

ND

8.6

0.02

ND

 

 

SN-17c 6-氨基-1-萘磺酰胺基(ANSN)熒光底物

結(jié)構(gòu)體

D-FPR-ANSNH-C 4 H 9 • 2HCl

對(duì)...有用

對(duì)因子VIIa有用

 

公式

DMSO

濃度

10 mM

 

動(dòng)力學(xué)特性

IIA

VIIa的

Ⅶa因子/ TF

XA

XIa的

aPC的

tPA的

纖溶酶

M

ND

186

102

ND

ND

53

ND

ND

ND

0.11

2.7

ND

ND

21

ND

ND

cat / K M.

ND

0.006

0.26

ND

ND

4

ND

ND

 

SN-18 6-氨基-1-萘磺酰胺基(ANSN)熒光底物

結(jié)構(gòu)體

Boc-L-(pF)FPR-ANSNH-C 2 H 5

對(duì)...有用

對(duì)tPA很有用

 

公式

DMSO

濃度

10 mM

 

動(dòng)力學(xué)特性

IIA

VIIa的

Ⅶa因子/ TF

XA

XIa的

aPC的

tPA的

纖溶酶

M

3.7

50

217

ND

ND

ND

71

ND

44

0.008

0.88

ND

ND

ND

1.03

ND

cat / K M.

120

0.002

0.04

ND

ND

ND

0.15

ND

 

 

SN-20 6-氨基-1-萘磺酰胺基(ANSN)熒光底物

結(jié)構(gòu)體

Boc-L-FPR-ANSNH-C 2 H 5

對(duì)...有用

對(duì)凝血酶有用

 

公式

DMSO

濃度

10 mM

 

動(dòng)力學(xué)特性

IIA

VIIa的

Ⅶa因子/ TF

XA

XIa的

aPC的

tPA的

纖溶酶

M

17

ND

ND

100

ND

540

47

ND

58

ND

ND

0.31

ND

2.2

0.011

ND

cat / K M.

34

ND

ND

0.003

ND

0.04

0.002

ND

 

SN-45 6-氨基-1-萘磺酰胺(ANSN)熒光底物

結(jié)構(gòu)體

L-EGR-ANSNH-C 3 H 7 •2 HBr

對(duì)...有用

因子XIa有用

 

公式

DMSO

濃度

10 mM

 

 

動(dòng)力學(xué)特性

IIA

VIIa的

Ⅶa因子/ TF

XA

XIa的

aPC的

tPA的

纖溶酶

M

100

ND

ND

110

225

440

ND

ND

2.5

ND

ND

0.2

82

17

ND

ND

cat / K M.

0.25

ND

ND

0.02

3.6

0.39

ND

ND

 

 

SN-54 6-氨基-1-萘磺酰胺基(ANSN)熒光底物

結(jié)構(gòu)體

BOC-D-VLR-ANSNH-C 4 H 9

對(duì)...有用

對(duì)aPC有用

 

公式

DMSO

濃度

10 mM

 

動(dòng)力學(xué)特性

IIA

VIIa的

Ⅶa因子/ TF

XA

XIa的

aPC的

tPA的

纖溶酶

M

19

42

170

19

ND

3.9

ND

ND

0.055

0.007

1.6

0.055

ND

2.1

ND

ND

cat / K M.

0.03

0.002

0.09

0.03

ND

5.2

ND

ND

 

SN-59 6-氨基-1-萘磺酰胺基(ANSN)熒光底物

結(jié)構(gòu)體

D-VPR-ANSNH-C 4 H 9 • 2HCl

對(duì)...有用

對(duì)凝血酶和aPC有用

 

公式

DMSO

濃度

10 mM

 

動(dòng)力學(xué)特性

IIA

VIIa的

Ⅶa因子/ TF

XA

XIa的

aPC的

tPA的

纖溶酶

M

2

89

52

160

520

54

110

ND

110

0.019

0.76

3.3

92

72

0.71

ND

cat / K M.

550

0.002

0.14

0.21

1.8

13

0.065

ND

參考

  1. Butenas, S., et al., Biochemistry, 31, 5399 (1992).
  2. Lawson, J.H., et al., J. Biol. Chem., 267, 4834 (1992).
  3. Lawson, J.H., et al., Methods in Enzymology, 222, 177 (1993).
  4. Butenas, S., et al., Biochemistry, 32, 6531 (1993).
  5. Butenas, S., et al., J. Biol. Chem., 269, 25838 (1994).
  6. Butenas, S., et al., Anal. Biochem., 225, 231 (1995).
  7. Butenas, S., and Mann, K.G., Biochemistry, 35, 1904 (1996).
  8. Butenas, S., et al., Biochemistry, 36, 2123 (1997).
  9. Butenas, S., et al., J. Biol. Chem., 272, 21527 (1997).
  10. Butenas, S., et al., Thromb. Haemost., 78, 1193 (1997).
  11. Hockin,M.F.,et al.,Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.,in press(1997).
  12. Butenas, S., et al., U.S.A. patent # 5,399,487.

 

出版物

 

  1. Komissarov, A., et al., Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol (August 7, 2009). (SN-5)
  2. Butenas et al. Thromb Haemost 1997;78:1193-201.

 

 

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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購(gòu)服務(wù)商

1:強(qiáng)大的進(jìn)口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進(jìn)口品等。

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