haemtech熒光底物

Fluorogenic Substrates

基于ANSN的生成基質(zhì)
的一般結(jié)構(gòu)示出了基于6-氨基-1-萘磺酰胺（ANSN）熒光底物的一般結(jié)構(gòu)。在本發(fā)明化合物家族中，R1是三肽，其COOH末端殘基通常是精氨酸。R2和R3可以是氫，烷基，芳基或環(huán)烷基。虛線表示各種絲氨酸蛋白酶的水解位點(diǎn)。

含有熒光報(bào)告基團(tuán)6-氨基-1-萘 - 磺酰胺（ANSN）的底物是用于監(jiān)測(cè)各種絲氨酸蛋白酶（1-12）的酶活性的有用化合物。在這類化合物中，ANSN報(bào)告基團(tuán)與短的三肽序列連接（在R1位置）。設(shè)計(jì)肽序列以優(yōu)化酶和底物之間的相互作用。可以添加到R2和R3位置的附加組分反映P'亞位點(diǎn)位置的變化，并且通常影響底物的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。作為有效底物的化合物在三肽和ANSN基團(tuán)之間水解。一旦從肽部分切割，ANSN組的相對(duì)熒光增加約1000倍。

下頁(yè)中確定的動(dòng)力學(xué)特性將有助于選擇合適的底物。已證明ANSN底物對(duì)因子VIIa（1-5,7,9,10,12）的分析特別有用。盡管單獨(dú)的因子VIIa的底物水解速率相對(duì)較慢，但當(dāng)將組織因子摻入測(cè)定系統(tǒng)時(shí)，幾種化合物如化合物SN-17a在kcat中表現(xiàn)出大的變化。

使用信息：
基于ANSN的底物作為DMSO中的10mM儲(chǔ)備溶液提供，并且通常可用于分析濃度范圍為400nM至低至50pM的酶。ANSN底物通常以50至100μM的終濃度使用，并且可以在大多數(shù)生理緩沖液（即TBS，HBS，PBS等）中稀釋至該終濃度。可以使用標(biāo)準(zhǔn)熒光計(jì)或熒光板讀數(shù)器監(jiān)測(cè)反應(yīng)（熒光的相對(duì)變化）。儀器設(shè)置在以下波長(zhǎng)（激發(fā)= 352nm，發(fā)射= 470nm）時(shí)可以使用動(dòng)力學(xué)或終點(diǎn)模式。通過(guò)在發(fā)射光束中采用390至450nm長(zhǎng)通截止濾光器，可以小化光偽影。

每種底物的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)列于下表中，并且在表格下方列出了期刊參考列表以供使用實(shí)例。

DMSO中的儲(chǔ)備底物溶液應(yīng)在4°C或更低溫度下冷凍保存，并應(yīng)避光保存。在這些條件下，化合物將保持穩(wěn)定超過(guò)一年。

SN-5 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物定價(jià)：請(qǐng)咨詢

 安全數(shù)據(jù)表

SN-7 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物

SN-13a 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物

SN-17a 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物

SN-17c 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物

SN-18 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物

SN-20 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物

SN-45 6-氨基-1-萘磺酰胺（ANSN）熒光底物

SN-54 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物

SN-59 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）熒光底物

參考

1. Butenas, S., et al., Biochemistry, 31, 5399 (1992).
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出版物

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2. Butenas et al. Thromb Haemost 1997;78:1193-201.

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