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如何選擇您的膠原蛋白檢測試劑盒?
膠原蛋白是脊椎動物體內豐富的蛋白質,約占全身蛋白質的30%。它們在組織結構中起著重要作用,并具有許多其他功能,如細胞生長、分化、組織修復和許多病理條件。
膠原蛋白是一個細胞外基質蛋白家族;在脊椎動物中,至少鑒定出27種膠原類型,具有42條不同的多肽鏈。I型、II型、III型、V型、XI型、XXIV型、XXVII型膠原是形成原纖維的膠原,含有三重螺旋結構,能夠捆綁成原纖維。
膠原的特點是存在穩定膠原三螺旋所需的羥脯氨酸殘基。
一些膠原的組織分布有限,例如II、IX和XI型膠原幾乎只存在于軟骨中,IV型膠原的存在僅限于基底膜。I型、II型和III型膠原是組織中含量豐富的膠原。
雖然人體中存在超過3公斤的膠原蛋白,但膠原蛋白是一種難以純化和分析的分子。這部分是由于膠原蛋白分子通過不同類型的交聯形成了廣泛的網絡,這使得膠原蛋白分子不可溶且難以提取。
目前,對于膠原蛋白的分析,存在各種類型的分析方法:
-ELISA檢測膠原特異性前體結構域
-ELISA檢測特定類型的膠原蛋白
-利用特異性膠原抗體進行蛋白質印跡
-組織切片天狼星紅染色
-基于天狼星紅的可溶性膠原蛋白分析
-樣品水解后羥脯氨酸殘留的測定(通過比色試劑盒或HPLC)。
QuickZyme Biosciences開發了一套分析膠原蛋白的方法,無論是從任何物種和任何組織中可溶的還是不溶的。
QuickZyme Biosciences提供膠原蛋白分析
•QuickZyme可溶性膠原蛋白分析
•QuickZyme總膠原蛋白測定
•QuickZyme敏感組織膠原蛋白分析
•QuickZyme羥脯氨酸測定
•QuickZyme敏感組織羥脯氨酸測定
QuickZyme可溶性膠原蛋白測定
該分析可識別可溶性或(酸/胃蛋白酶)溶解的纖維狀膠原蛋白。
該分析為比色法,采用96孔板格式,基于膠原與天狼星紅(一種含磺酸基的陰離子染料)的沉淀。染料在高pH下從沉淀的絡合物中釋放,然后進行比色檢測。對測定進行了優化,使其他蛋白質(如白蛋白)不會干擾。明膠(變性膠原蛋白)不被該分析所識別。該試驗需要可溶性或可溶性的原纖維膠原。
應用:該方法用于測定細胞培養基中的可溶性膠原蛋白和細胞提取物中的可溶性膠原蛋白(酸或酸/胃蛋白酶)。化驗不是膠原蛋白分析:哪種化驗可以用于什么應用?
建議用于組織,因為大多數組織膠原蛋白是交聯的和不溶的。
QuickZyme總膠原蛋白測定
該分析可識別所有類型的膠原蛋白(成熟、未成熟、前膠原、降解膠原蛋白、交聯膠原蛋白、各種來源和種類的膠原蛋白)。
該分析為比色法,采用96孔板格式,并基于羥脯氨酸的定量,羥脯氨酸是氨基酸脯氨酸的一種改良版本,幾乎只存在于膠原蛋白中。含膠原蛋白樣品經酸水解后,羥脯氨酸從膠原蛋白中釋放出來。水解在95℃下進行,水解產物可直接用于羥脯氨酸分析,無需洗滌或干燥步驟。
應用:該方法用于總膠原蛋白的定量。這包括所有前膠原、未折疊膠原、成熟膠原以及樣本中所有膠原類型的膠原降解產物和明膠。由于第一步是樣品的*水解,提取膠原蛋白的困難不起作用。該分析適用于所有類型
樣本,包括任何物種的組織。由于組織樣品中的未知物質,該分析受到基質效應的影響。在許多樣品中,可以通過稀釋水解物來防止這種影響。如果由于膠原蛋白濃度較低(例如在肝組織中),因此不需要充分稀釋水解物,我們建議使用敏感組織
膠原蛋白測定QuickZyme羥脯氨酸測定
該測定與總膠原蛋白測定相似,不同之處在于不包括膠原蛋白水解的方案和試管。
應用:該分析與總膠原蛋白分析具有相同的應用領域,但適用于有自己的水解方法或收集待分析水解樣品的客戶。
QuickZyme敏感組織膠原測定
該測定法與QuickZyme總膠原蛋白測定法非常相似,但不受基質效應的影響,因此是低膠原蛋白濃度和大量基質效應的肝組織等組織的測定法。
應用:該測定法用于測定(組織)樣品中的總膠原蛋白,該樣品具有低濃度的膠原蛋白和基質效應,需要在QuickZyme總膠原蛋白測定中稀釋
QuickZyme敏感組織羥脯氨酸測定
該試驗與QuickZyme敏感組織膠原蛋白試驗相似,不同之處在于不包括膠原蛋白水解的方案和管道。
應用:該分析與QuickZyme敏感組織膠原蛋白分析具有相同的應用領域,但適用于有自己的酸水解方法或收集待分析水解樣品的客戶。
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