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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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swant 8181說(shuō)明書
產(chǎn)品：兔抗Hpcal4(hippocalcin-like 4)
代碼編號(hào)：8181
批號(hào)：1898
形式：凍干全血清（不含防腐劑）。
數(shù)量：200µl。
復(fù)溶：用200µl雙蒸餾水。
描述
用N端含有6-his標(biāo)簽的重組小鼠hpcal4免疫家兔，產(chǎn)生抗hpcal4的抗血清。評(píng)價(jià)抗體的特異性和效價(jià)：a）通過(guò)生物素-親和素標(biāo)記4%多聚甲醛固定大腦的冷凍、振動(dòng)和石蠟切片，和b）通過(guò)免疫印跡。
本品為抗鈣結(jié)合蛋白Hpcal4[1]的多克隆抗血清， 與hippocalcin相關(guān)的傳感器EF手家族。這種抗血清以一種*的模式將大腦染色（圖1；參見(jiàn)www.brain-map。。ｏｒｇ）。抗血清 通過(guò)免疫印跡測(cè)定，與嚙齒類動(dòng)物組織中的Hpcal4發(fā)生特異性反應(yīng) （圖2）。
用抗Hpcal4的抗血清1898孵育的大鼠大腦水平切片的納米原蟲掃描。標(biāo)記大腦皮層上層和尾殼核(Cpu)。蒼白球和丘腦仍未染色。
免疫印跡
從大鼠全腦中分離可溶性蛋白的提取物，并通過(guò)SDS-PAGE進(jìn)行分離。在免疫印跡中，抗血清8181可特異性識(shí)別22 kDa的條帶（箭頭）。
圖2大鼠腦勻漿的免疫印跡。中的箭頭表示22 kDa處的條帶。
用途
Hpcal4屬于“傳感器"鈣結(jié)合蛋白類。它主要發(fā)生在大腦中，在大的神經(jīng)細(xì)胞亞群中（也見(jiàn)Allen大腦圖譜（http://www.brain-map。。ｏｒｇ/).
工作稀釋度
免疫組織化學(xué)：多聚甲醛(4%)或福爾馬林固定組織、冷凍狀態(tài)或石蠟切片上為1:2'000-1:5'000。
免疫印跡：1:1'000-1:2'000。
對(duì)于免疫組織化學(xué)和免疫印跡，采用抗生物素蛋白-生物素法測(cè)定滴度。我們建議確定宜稀釋度 by 滴定實(shí)驗(yàn)。
儲(chǔ)存條件
復(fù)溶后，以小份（例如1µl）冷凍并保持在-80 ℃（或至少-20 ℃）。連續(xù)使用時(shí)，保持在4 ℃（含0.01%疊氮化納）。避免反復(fù)凍融。
