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procomcure PCCSKU1032說明書
VitaTaq®HS PCR試劑盒
僅供研究使用
Procomcure Biotech GmbHwww.procomcure。。com office@procomcure.com
VitaTaq®HS DNA聚合酶是一種耐用可靠的Taq DNA聚合酶,適用于所有常見的PCR應用,如菌落PCR、克隆應用、高通量PCR和常規PCR。其抗體介導的HotStart功能允許在室溫下進行反應設置,并*控制反應開始。
產品 | 尺寸 | 皮膚單位 |
| 200 U | PCCSKU1032 |
VitaTaq®HS PCR試劑盒 | 500 U | PCCSKU1033 |
| 2500 U | PCCSKU1034 |
儲存條件
將所有組分儲存在-20 ℃下,避免反復凍融循環。
所需的其他材料
無核酸酶dH2O
無核酸酶PCR管/板和密封選項熱循環儀
PCR引物(各10µM)dNTP混合物(各10 mM)模板DNA
反應設置
- 將所有反應組分*解凍并輕輕混合,以確保所有組分均勻分布。在無菌、無核酸酶試管中制備反應液,加入聚合酶后輕輕混合。通過快速旋轉收集試管底部的所有液體。
組件 | 體積 | 終濃度 |
10X PCR緩沖液 | 5 µl | 1X |
dNTP混合物(各10 mM) | 0.5 µl | 各0.1 mM |
引物1(10µM) | 1 µl | 0.1 µM – 0.5 µM |
引物2(10µM) | 1 µl | 0.1 µM – 0.5 µM |
VitaTaq®HS DNA聚合酶(2 U/µL) | 0.5 µl | 1 U |
模板DNA | 1 µl | <1 µg |
dH2O | to 50 µl |
|
2) 根據這些指南進行循環:
步驟 | 周期 | 溫度 | 持續時間 |
初始變性 | 1 | 94°C | 5 min |
|
30-35 | 94°C | 30秒 |
擴增 | Tm-5 ℃ | 30秒 | |
| 72°C | 1 min/kb | |
終擴展 | 1 | 72°C | 5 min |
保持 | 1 | 4°C |
|
3) 使用適當百分比的丙烯酰胺或瓊脂糖凝膠通過凝膠電泳分析擴增反應。