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genebridges K002說明書
計數(shù)器選擇BAC修改套件
對于使用反選擇盒的BAC修飾,也用于細(xì)菌染色體
- ID:K002
Counter Selection BAC Modification Kit
計數(shù)器選擇BAC修改套件
特征
快速BAC修改(2-3周)
高紅/ ET重組效率
方便地去除Red / ET質(zhì)粒
效率遠(yuǎn)高于pSacB-neo系統(tǒng)
應(yīng)用
片段交換
標(biāo)記插入和刪除,不留選擇標(biāo)記或任何不需要的序列
引入短序列,例如點(diǎn)突變,loxP位點(diǎn),限制性位點(diǎn)等。
也可用于細(xì)菌染色體修飾和常見的ColE1起源質(zhì)粒
描述
這是基于鏈霉素選擇的反選擇盒pRpsL-neo的新版本。該試劑盒設(shè)計用于通過使用反選擇盒在2-3周內(nèi)修飾任何類型的細(xì)菌人工染色體(BAC)。包括的反選擇盒pRpsL-neo基于鏈霉素選擇,其顯示出比pSacB-neo或類似系統(tǒng)高得多的效率。該試劑盒還可用于細(xì)菌染色體和常見的ColE1起源質(zhì)粒。該試劑盒結(jié)合了高Red / ET效率以及重組后方便去除Red / ET重組蛋白表達(dá)質(zhì)粒pRedET。
內(nèi)容
紅/ ET重組蛋白表達(dá)質(zhì)粒pRed / ET。通過用該質(zhì)粒轉(zhuǎn)化,可以使任何大腸桿菌菌株Red / ET熟練
BAC宿主大腸桿菌菌株DH10B已攜帶Red / ET質(zhì)粒
pRpsL-新霉素模板用于您自己的實(shí)驗(yàn)
在150kb BAC中引入點(diǎn)突變的陽性對照
詳細(xì)的方案,質(zhì)粒描述,圖譜和序列
Sequences
rpsL-kanR/neoR selection cassette
promoter rpsL kanR/neoR
GGCCTGGTGATGATGGCGGGATCGTTGTATATTTCTTGACACCTTTTCGGCATCG CCCTAAAATTCGGCGTCCTCATATTGTGTGAGGACGTTTTATTACGTGTTTACGA AGCAAAAGCTAAAACCAGGAGCTATTTAATGGCAACAGTTAACCAGCTGGTACGC AAACCACGTGCTCGCAAAGTTGCGAAAAGCAACGTGCCTGCGCTGGAAGCATGCC CGCAAAAACGTGGCGTATGTACTCGTGTATATACTACCACTCCTAAAAAACCGAA CTCCGCGCTGCGTAAAGTATGCCGTGTTCGTCTGACTAACGGTTTCGAAGTGACT TCCTACATCGGTGGTGAAGGTCACAACCTGCAGGAGCACTCCGTGATCCTGATCC GTGGCGGTCGTGTTAAAGACCTCCCGGGTGTTCGTTACCACACCGTACGTGGTGC GCTTGACTGCTCCGGCGTTAAAGACCGTAAGCAGGCTCGTTCCAAGTATGGCGTG AAGCGTCCTAAGGCTTAAGGAGGACAATCATGATTGAACAAGATGGATTGCACGC AGGTTCTCCGGCCGCTTGGGTGGAGAGGCTATTCGGCTATGACTGGGCACAACAG ACAATCGGCTGCTCTGATGCCGCCGTGTTCCGGCTGTCAGCGCAGGGGCGCCCGG TTCTTTTTGTCAAGACCGACCTGTCCGGTGCCCTGAATGAACTGCAGGACGAGGC AGCGCGGCTATCGTGGCTGGCCACGACGGGCGTTCCTTGCGCAGCTGTGCTCGAC GTTGTCACTGAAGCGGGAAGGGACTGGCTGCTATTGGGCGAAGTGCCGGGGCAGG ATCTCCTGTCATCTCACCTTGCTCCTGCCGAGAAAGTATCCATCATGGCTGATGC AATGCGGCGGCTGCATACGCTTGATCCGGCTACCTGCCCATTCGACCACCAAGCG AAACATCGCATCGAGCGAGCACGTACTCGGATGGAAGCCGGTCTTGTCGATCAGG ATGATCTGGACGAAGAGCATCAGGGGCTCGCGCCAGCCGAACTGTTCGCCAGGCT CAAGGCGCGCATGCCCGACGGCGAGGATCTCGTCGTGACCCATGGCGATGCCTGC TTGCCGAATATCATGGTGGAAAATGGCCGCTTTTCTGGATTCATCGACTGTGGCC GGCTGGGTGTGGCGGACCGCTATCAGGACATAGCGTTGGCTACCCGTGATATTGC TGAAGAGCTTGGCGGCGAATGGGCTGACCGCTTCCTCGTGCTTTACGGTATCGCC GCTCCCGATTCGCAGCGCATCGCCTTCTATCGCCTTCTTGACGAGTTCTTCTGA