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celltechnology APODNA說明書

Apo ssDNA™

An antibody assay to detect DNA Damage (Single Stranded) in apoptotic cells

用于檢測凋亡細(xì)胞中DNA損傷（單鏈）的抗體測定

PRODUCT CODE: APODNA

產(chǎn)品描述

介紹

用于評(píng)估與細(xì)胞凋亡相關(guān)的DNA損傷的廣泛使用的細(xì)胞化學(xué)技術(shù)是末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的原位末端標(biāo)記或TUNEL測定。然而，TUNEL測定法的缺點(diǎn)在于假陽性染色使得測定法不可靠作為細(xì)胞凋亡的標(biāo)記物（參見圖1）1-5。細(xì)胞凋亡的一種更普遍和特異的標(biāo)志物是細(xì)胞核中的形態(tài)學(xué)變化，其反映了染色質(zhì)凝聚成致密質(zhì)量6-7

進(jìn)一步的生物化學(xué)和細(xì)胞化學(xué)研究表明凋亡DNA對熱變性的易感性增加。通過掃描量熱法檢測細(xì)胞核以檢測熱誘導(dǎo)的DNA變性和通過電泳分析DNA的片段化分析表明，完整的凋亡DNA在較低溫度下易于變性而非非凋亡細(xì)胞變性8

主要優(yōu)點(diǎn)

• 與TUNEL分析相比，更可靠 - 沒有假陽性信號(hào)。
• 讀數(shù) - 流式細(xì)胞儀，96孔板讀數(shù)器，熒光顯微鏡。
• 產(chǎn)生定量和定性結(jié)果。給出了強(qiáng)烈的積極信號(hào)。
• 易于使用：結(jié)果不到60分鐘。
• 無需運(yùn)行DNA梯度分析來檢測細(xì)胞中的DNA損傷。

分析原則

Cell Technology推出了Apo ssDNA，這是一種基于抗體的檢測方法，用于檢測凋亡細(xì)胞中的DNA損傷（單鏈DNA：ssDNA）。

該測定使用針對ssDNA產(chǎn)生的抗體。該抗體僅在凋亡細(xì)胞9-12中識(shí)別大片熱變性ssDNA

圖（A）。MAb對凋亡但不是壞死細(xì)胞的ssDNA染色。在流式細(xì)胞儀上產(chǎn)生在甲酰胺中加熱并用MAb F7-26染色的MDA-468細(xì)胞的熒光分布。星形孢菌素誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，疊氮化na，皂苷或高溫誘導(dǎo)壞死。注意，凋亡細(xì)胞被MAb強(qiáng)烈染色，而壞死細(xì)胞和對照細(xì)胞的熒光譜相似。

圖（B）。細(xì)胞凋亡和壞死細(xì)胞的TUNEL染色。在流式細(xì)胞儀上產(chǎn)生用TUNEL染色的MDA-468細(xì)胞的熒光分布。星形孢菌素誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，疊氮化na，皂苷或高溫誘導(dǎo)壞死。注意，細(xì)胞凋亡早期的細(xì)胞（星形孢菌素3小時(shí)）被弱染色，而晚期凋亡細(xì)胞（星形孢菌素5小時(shí)）和壞死細(xì)胞被TUNEL 12強(qiáng)烈染色。

套件內(nèi)容和長期存儲(chǔ)