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Haematologic HCPC-0070說明書
HTI HCPC-0070
Haematologic Technologies，Inc。（HTI）是一家ISO 9001：2015注冊公司，是一家專業從事體外研究用高質量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點是凝血級聯中涉及的蛋白質，以及骨代謝的調節。HTI產品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質，包括酶原，酶，輔因子和抑制劑，以及單克隆和多克隆抗體的互補系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管，用于臨床研究。提供的服務包括定制蛋白質純化，蛋白質修飾，化驗開發，合同制造和合同研究。
Haematologic HCPC-0070說明書
蛋白質C. Protein C
蛋白質C
的結構域表示蛋白質C的結構域結構，其中：GLA =含有γ-羧基谷氨酸殘基的區域，EGF =含有與人表皮生長因子同源的序列的區域，AP =在酶原轉化為釋放后釋放的活化肽。活性絲氨酸蛋白酶，催化域=含有絲氨酸蛋白酶催化三聯體的區域。箭頭表示在酶原激活期間被凝血酶蛋白水解切割的位點。
HCPC-0070 人體蛋白C
|
尺寸 | 100微克 |
公式 | 50％甘油/水（v / v） |
存儲 | -20℃下 |
純度 | 通過SDS-PAGE> 95％ |
活動決定 | 通過顯色測定法<0.5％aPC活性 |
保質期（妥善保存） | 12個月 |
BCPC-1070 牛蛋白C
尺寸 | 100微克 |
公式 | 50％甘油/水（v / v） |
存儲 | -20℃下 |
純度 | 通過SDS-PAGE> 95％ |
活動決定 | 通過顯色測定法<0.5％aPC活性 |
保質期（妥善保存） | 12個月 |
維生素K依賴性酶原蛋白C在肝臟中作為單鏈多肽合成，隨后通過從前體分子中去除二肽（Lys-146和Arg-147）轉化為二硫鍵連接的異二聚體（1） ，2）。在血漿中觀察到痕量的單鏈形式。負責蛋白C與磷脂囊泡的鈣依賴性結合的輕鏈含有11個γ-羧基谷氨酸（gla）殘基，1b-羥基天冬氨酸殘基和2個表皮生長因子（EGF）同源結構域。絲氨酸蛋白酶催化三聯體位于重鏈中。人蛋白C易于從重鏈的COOH末端蛋白水解切割肽（Mr = 3000），產生稱為β-蛋白C的改變形式。沒有觀察到α-和β-蛋白C之間的功能區別。在人蛋白C的重鏈Arg-12（牛的Arg-14）中的單個切割將酶原轉化為絲氨酸蛋白酶，活化的蛋白C.這種切割由α-凝血酶和內皮細胞表面之間的復合物催化。蛋白血栓調節蛋白。與其他維生素K依賴性凝血因子相反，活化蛋白C通過催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血劑的作用。APC還通過與纖溶酶原激活物抑制劑形成復合物而促成纖維蛋白溶解反應。這種切割由α-凝血酶和內皮細胞表面蛋白血栓調節蛋白之間的復合物催化。與其他維生素K依賴性凝血因子相反，活化蛋白C通過催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血劑的作用。APC還通過與纖溶酶原激活物抑制劑形成復合物而促成纖維蛋白溶解反應。這種切割由α-凝血酶和內皮細胞表面蛋白血栓調節蛋白之間的復合物催化。與其他維生素K依賴性凝血因子相反，活化蛋白C通過催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而起抗凝血劑的作用。APC還通過與纖溶酶原激活物抑制劑形成復合物而促成纖維蛋白溶解反應。
如Haley等人所述，通過修改Walker程序（3），從新鮮的檸檬酸化牛血漿制備牛蛋白C. （4）。使用免疫親和層析（5）和常規技術（4,9）的組合，從新鮮冷凍的檸檬酸化人血漿制備人蛋白C. 蛋白質C以50％（體積/體積）甘油/ H2O提供，應儲存在-20℃。通過SDS-PAGE分析確定純度，并使用基于顯色底物的測定法測量活性。
加載 | 人類蛋白質C，每個泳道1μg |
緩沖 | MOPS |
標準 | SeeBluePlus 2; 肌球蛋白（191 kDa），磷酸化酶B（97 kDa），BSA（64 kDa），谷氨酸脫氫酶（51 kDa），酒精脫氫酶（39 kDa），碳酸酐酶（28 kDa），肌紅蛋白紅（19 kDa），溶菌酶（14 kDa的） |
本土化 | 等離子體 | ||||||||
血漿濃度 | 4-5μg/ ml（人）（6） | ||||||||
行動方式 | 酶原; 絲氨酸蛋白酶活化蛋白C（APC）的前體 | ||||||||
分子量 | 62,000（人類）（7） | ||||||||
消光系數 |
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等電點 | 4.4-4.8（人類）（8） | ||||||||
結構體 | 兩條鏈，Mr = 41,000和21,000，二硫鍵連接，NH2-末端gla結構域兩個EGF結構域 | ||||||||
碳水化合物百分比 | 23％（人類）（7） | ||||||||
翻譯后修改 | 十一個gla殘留物（牛），九個gla殘基（人），一個β-羥基天冬氨酸 |
- 1. Esmon，CT，Thromb進展。和Hemosts。，10,25（1984）。
- Stenflo，J.，Semin。在Thromb。和Hemostas。，10,109（1984）。
- Walker，FJ，et al。，Biochim。生物物理學。Acta，571,333（1979）。
- Haley，PE，et al。，J.Biol。Chem。，264,16303（1989）。
- Jenny，RJ，et al。，Prep。Biochem。，16,227（1986）。
- Griffen，JH，et al。，Blood，60,261（1982）。
- Kisiel，W.，et al。，Methods Enzymol。，80,320（1981）。
- Discipio，RG等，Biochemistry，18,899（1979）。
- Bajaj，SP，et al。，Prep。Biochem。，11,397（1981）。
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