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名稱：C3蛋白        C3 Protein         

目錄號(hào)：     A113

提供的大小：         250微克/瓶

濃度：          1.0 mg / mL（見實(shí)際濃度分析證書）           

形式：                         冷凍液體

活性：                     與正常人血清標(biāo)準(zhǔn)相比> 70％（見分析證書）。

純度：                        通過(guò)SDS-PAGE> 95％

緩沖液：                       10mM磷酸鈉，145mM NaCl，pH7.2

滅絕科夫。       阿_280 納米=  1.03以1.0毫克/毫升

分子量：   185,000Da（2鏈）

防腐劑：             無(wú)，0.22μm過(guò)濾

存儲(chǔ)：                     -70 ^Ò C或以下。  避免凍結(jié)/解凍（每次解凍> 10％的活性損失）。

資源：                       正常 人血清（通過(guò)認(rèn)證測(cè)試顯示為陰性

對(duì)于 HBsAg，HTLV-I / II，STS以及針對(duì)HCV，HIV-1和HIV-II的抗體）。

預(yù)防措施：              使用正常的預(yù)防措施處理人體血液制品。

產(chǎn)地：                       制造在美國(guó)。

一般描述

天然人C3是含有兩個(gè)二硫鍵連接的鏈的天然糖基化（?2.7％）多肽。  C3對(duì)補(bǔ)體激活的所有三種途徑的激活至關(guān)重要（Law，SKA和Reid，KBM（1995））。  每個(gè)途徑的啟動(dòng)產(chǎn)生與目標(biāo)表面結(jié)合的蛋白水解酶復(fù)合物（C3轉(zhuǎn)化酶）。  這些酶切割C3中的肽鍵釋放過(guò)敏毒素 C3a并激活C3b。  在短時(shí)間內(nèi)（?60μs），這種新生C3b能夠與目標(biāo)表面上的羥基反應(yīng)并共價(jià)偶聯(lián)。  碳水化合物是的目標(biāo)，但蛋白質(zhì)羥基和氨基也會(huì)發(fā)生反應(yīng)。  調(diào)用C3b標(biāo)記目標(biāo)曲面的過(guò)程稱為調(diào)理作用。  新生C3b中的反應(yīng)性位點(diǎn)是硫酯（Tack BJ等（1980）; Pangburn MK和Müller-Eberhard HJ（1980）），C3b通過(guò)共價(jià)酯鍵連接到靶上（如果形成酰胺鍵，則形成C3b與氨基連接）。  補(bǔ)體激活過(guò)程中激活的大多數(shù)C3不會(huì)附著在表面上，因?yàn)樗牧蝓ヅc水反應(yīng)形成液相C3b，液相C3b由因子H和I迅速失活而形成iC3b。  表面結(jié)合的C3b在所有三種途徑中都是必需的，以有效激活C5和形成裂解靶細(xì)胞膜的C5b-9復(fù)合物。  表面結(jié)合的C3b及其分解產(chǎn)物iC3b和C3d被淋巴和吞噬細(xì)胞上的許多受體識(shí)別，所述淋巴和吞噬細(xì)胞使用C3b配體刺激抗原呈遞至適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的細(xì)胞。  終的結(jié)果是目標(biāo)特異性B細(xì)胞和T細(xì)胞種群的擴(kuò)大。

物理特性和結(jié)構(gòu)

分子量：  185,000道爾頓，由兩個(gè)二硫鍵連接組成。  α鏈?zhǔn)?10,000道爾頓（含有C3a和C3d結(jié)構(gòu)域），β鏈?zhǔn)?5,000道爾頓。  α和β鏈通過(guò)單個(gè)二硫鍵連接。C3   的等電位約為。5.9

在C3轉(zhuǎn)化酶切割C3后，從α鏈的N端釋放C3a（77個(gè)氨基酸片段，9083Da），并且C3b（176,000Da）共價(jià)連接至活化劑表面。  已經(jīng)描述了C3和C3b的晶體衍生的結(jié)構(gòu)（Gros，P。（2008）），并且這些顯示C3a-C3b肽鍵斷裂后在C3的C3b部分發(fā)生大的構(gòu)象變化。 

            天然C3和C4在血漿中循環(huán)，分子內(nèi)硫酯鍵連接C3d或C4d結(jié)構(gòu)域中的甘氨酸和谷氨酰胺殘基。  這些硫酯鍵容易受到胺（例如氨，甲胺，羥胺和肼）的親核攻擊，所有這些都被用于使血清中的補(bǔ)體失活。 

            CAS號(hào)碼：  80295-41-6

MDL編號(hào)：  MFCD00130836      

功能

            C3對(duì)于有效補(bǔ)體活化和隨后將抗原遞呈至適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的細(xì)胞是*的（Lambris，JD（1988））。  在識(shí)別出目標(biāo)補(bǔ)體被三種補(bǔ)體途徑中的一種激活后，酶（C3轉(zhuǎn)化酶）在靶表面上形成。  這些酶（C4b ，C2a 或C3b，Bb）在α鏈的精氨酸 77釋放過(guò)敏毒素C3a并將C3b沉積在靶表面上后切割C3 。  雖然有一個(gè)非常薄弱的??C3旁路系統(tǒng)，通過(guò)經(jīng)典和凝集素途徑（C4b ，C2a 可以以C3b，C4b，C2a的大約1/2000的比率以約1/2000的比率激活C5而不具有C3b），C3b對(duì)于有效的C5激活是必需的（Rawal N.和Pangburn MK（2003））。

            純化的C3對(duì)于凍融非常敏感，在每個(gè)冷凍/解凍循環(huán)中都會(huì)損失5-10％的活性。  這也是中間溫度如-20敏感^ö C.   的時(shí)間越長(zhǎng)其保持在中間溫度越活性喪失。 在-20幾個(gè)小時(shí)^Ø C能*滅活它，即使它仍然*凍結(jié)。

測(cè)定

            補(bǔ)充激活需要C3。  因此，C3功能的典型測(cè)定使用缺乏C3的系統(tǒng)中的細(xì)胞裂解終點(diǎn)，除了來(lái)自被測(cè)定的來(lái)源。  有三種基本測(cè)定。  1）抗體致敏的綿羊紅細(xì)胞（EA）可用于使用貧C3的人血清的CH50型分析。  該測(cè)定的靈敏度約為50ng C3。  2）EA和純化組分C1，C4和C2可用于制備利用C3進(jìn)行有效C5激活和裂解的EAC142細(xì)胞（Dodds，AW和Sim，RB（1997））。   該測(cè)定的靈敏度約為5ng C3。  3）可以使用替代性途徑測(cè)定法，其在5mM MgEGTA存在下使用兔紅細(xì)胞和貧C3人血清。  該測(cè)定的靈敏度約為200ng C3。

體內(nèi)

            血清濃度為1.0至1.5mg / mL，平均1.2mg / mL，這使得C3成為血液中豐富的補(bǔ)體蛋白。  它代表約。血液中總蛋白的2.5％，不包括白蛋白和免疫球蛋白，是血漿中蛋白質(zhì)的?8％。  合成的主要部位是肝，但是C3也可以在巨噬細(xì)胞，嗜中性粒細(xì)胞，星形膠質(zhì)細(xì)胞以及身體許多組織中的內(nèi)皮和上皮細(xì)胞中產(chǎn)生。

規(guī)則

            C3的生物合成在IL-1，IL-6，TNF-α和LPS合成C3的大多數(shù)細(xì)胞中上調(diào)。  嗜中性粒細(xì)胞被  IL-1和IFN-γ 下調(diào)

遺傳學(xué)

            人類染色體定位19p13.3-p13.2。   小鼠染色體定位染色體17和大鼠染色體9.  登錄號(hào)K02765（人）和K02782（小鼠）。  人類基因組結(jié)構(gòu)：該基因跨越41kb和41個(gè)外顯子

不足之處

             完整的人C3缺陷很少見，但已發(fā)現(xiàn)一些病例。重要的是，患有這種疾病的成年人雖然因免疫力受損而存在高風(fēng)險(xiǎn)，但未必是致命的。  一個(gè)充分表征的2歲兒童缺陷的病例表明，該缺陷與復(fù)發(fā)性化膿性感染，樹突細(xì)胞分化受損，獲得B細(xì)胞記憶能力受損和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞發(fā)育不足有關(guān)。  疫苗接種僅產(chǎn)生小的短期抗體應(yīng)答（Ghannam A等，（2008））。  其他人類病例和許多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭С诌@些結(jié)論（Singer，L等人，（1994））。  這些免疫系統(tǒng)缺陷與C3缺陷的關(guān)聯(lián)強(qiáng)烈支持C3在先天性和適應(yīng)性免疫應(yīng)答中的主要作用。

            C3的缺乏還導(dǎo)致不能調(diào)理細(xì)菌，導(dǎo)致吞噬作用降低，不能釋放C3a并且嚴(yán)重降低產(chǎn)生C和C5b的能力，這損害了終端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9的生成。 

疾病

            C3的沉積，即C3b與微生物或宿主組織的附著是炎癥部位補(bǔ)體激活的標(biāo)志。  許多疾病表現(xiàn)出組織化學(xué)可 識(shí)別的C3b沉積物作為其病理學(xué)的一部分，或者至少作為病理學(xué)標(biāo)志物（Law，SKA和Reid，KBM（1995）; Ross，GD（1986））。  這些疾病包括缺血/再灌注事件，例如心臟病發(fā)作和中風(fēng)以及細(xì)菌，病毒，寄生蟲和真菌感染。  抗體介導(dǎo)的自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和自身免疫性溶血性貧血的特征在于C3b在組織上的沉積。  即使抗體反應(yīng)未在主機(jī)補(bǔ)執(zhí)導(dǎo)可以depositied。  補(bǔ)體的主要功能是幫助巨噬細(xì)胞吞噬系統(tǒng)清除循環(huán)免疫復(fù)合物。  高水平的復(fù)合物可能壓倒該系統(tǒng)，導(dǎo)致補(bǔ)體和免疫復(fù)合物在組織和腎中沉積，導(dǎo)致腎小球腎炎，致密沉積疾病和關(guān)節(jié)炎。  增加或減少補(bǔ)體活性的C3變體與諸如年齡相關(guān)性黃斑變性的疾病有關(guān)。  C3沉積物還在疾病中表現(xiàn)出信號(hào)補(bǔ)體激活，例如陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿，遺傳性溶血性尿毒癥綜合征，移植排斥反應(yīng)和炎癥性皮膚病如血管性水腫。

注意事項(xiàng)/毒性/危險(xiǎn)

            這種蛋白質(zhì)的來(lái)源是人血清，因此必須使用適合處理任何血源性產(chǎn)品的預(yù)防措施，盡管來(lái)源通過(guò)認(rèn)證測(cè)試顯示HBsAg，HTLV-I / II，STS陰性，HCV抗體，HIV-1和HIV-II。

            危險(xiǎn)代碼：B           WGK德國(guó) 3

            MSDS可根據(jù)要求提供。

參考

Dodds，AW和Sim，RB編輯（1997年）補(bǔ)充。實(shí)用方法（ISBN 019963539）牛津 大學(xué) 按， 牛津。

Ghannam A等，（2008）人類C3缺陷與樹突細(xì)胞分化，記憶B細(xì)胞和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞損傷相關(guān)。J Immunol。1 ; 181（7）：5158-66。

Gros，P.，Milder，F(xiàn)J，Janssen，BJ（2008）由構(gòu)象變化驅(qū)動(dòng)的補(bǔ)體。  Nat Rev Immunol。8：48-58。

Lambris，JD（1988）C3 的多功能作用，補(bǔ)充的第三個(gè)組成部分。免疫 今日。9：387-93。 

Law，SKA和Reid，KBM（1995）Complement ^2nd Edition（ISBN ）牛津 大學(xué) 按， 牛津。

Morley，BJ和Walport，MJ（2000）The Complement Facts Book（ISBN ）Academic Press，倫敦。

Pangburn MK和Müller-Eberhard HJ（1980）C3中假定的硫酯鍵與活化旁路途徑的關(guān)系以及C3b與補(bǔ)體生物學(xué)靶點(diǎn)的結(jié)合。J Exp Med。152：1102至1114年。

Rawal N.和Pangburn MK（2003）形成補(bǔ)體經(jīng)典途徑的高親和力C5轉(zhuǎn)化酶。  J Biol Chem。278：38476-83。

羅斯，GD（1986）補(bǔ)體系統(tǒng)的免疫生物學(xué)。（ISBN 0-12-5976402）學(xué)術(shù)出版社，  奧蘭多。

Singer，L等，（1994）補(bǔ)體C3缺陷：人，動(dòng)物和實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?nbsp; Pathobiology 62：14-28。

大頭釘BF， 哈里森RA，Janatova J，Thomas ML，Prahl JW。（1980） 人補(bǔ)體第三組分中存在內(nèi)部硫酯鍵的證據(jù)。  Proc Natl Acad Sci U S A.77：5764-8。

僅供研究使用。

不適用于人類或藥物使用。

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