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產品線:
碳水化合物分析用的酶
聚糖標準品
糖純化
Ludger Tag聚糖標記試劑盒
糖生物學用HPLC色譜柱
糖測序試劑盒
去糖基化試劑盒
MS / MS數據分析工具
DMB Sialic Acid Labeling Kit
DMB唾液酸標簽試劑盒 |
貨號:LT-KDMB-A1
唾液酸分析是ICH Q6B生物藥物表征指南中規定的監管要求。特別是,人和非人類唾液酸(NeuAc / NANA和NeuGc / NGNA分別)的相對水平的測定是重要的,因為一些患者具有高水平的抗NeuGc抗體,這可能導致NeuGc-含有生物藥物(Nguyen等,2005)。NeuAc和NeuGc在分析糖蛋白時的意義意味著它通常被認為是生物治療藥物的關鍵質量屬性(CQA)。用于確定NeuAc與NeuGc的比例的廣泛使用的方法如下:
- 通過溫和的酸水解從糖蛋白釋放唾液酸殘留物。
- 用1,2-二氨基-4,5-二甲氧基苯(DMB)熒光標記釋放的唾液酸。
- 通過HPLC或UHPLC對DMB標記的唾液酸進行相對定量分析。
LudgerTag DMB試劑盒(目錄號LT-KDMB-A1)提供從糖蛋白中釋放唾液酸所需的所有物質,并用DMB標記它們。該試劑盒包含多達22個糖蛋白樣品的試劑和材料(每個樣品50-100μg糖蛋白)。每個標簽應使用每個樣品約10 pmol至2.5 nmol唾液酸。
包含在試劑盒中的是唾液酸參考面板(含Neuc,Neu5Gc,Neu5,7Ac2,Neu5,Gc9Ac,Neu5,9ac2和Neu5,7,(8),9Ac3Gc)以及NeuAc和NeuGc定量標準。這三個標準可以與發布的唾液酸樣品一起用DMB標記。制備NeuAc和NeuGc定量標準系列稀釋液可進行定量分析。有關如何執行此操作的信息,請參見LudgerTag DMB套件指南。如果需要,NeuAc和NeuGc定量標準也可單獨購買。
對于陽性對照,我們建議使用含有NeuAc和NeuGc唾液酸的胎球蛋白糖蛋白。水可以用作陰性對照。
參考文獻:
Nguyen DH,Tangvoranuntakul P和Varki A.(2005)Effects of Natural Human Antibodies against a Nonhuman Sialic Acid That Metabolically Incorporated into Activated and Malignant Immune Cells。J Immunol 175:228-236。
LudgerTag DMB標簽套件已經開發用于唾液酸的定性分析
該試劑盒包含兩套標記試劑和唾液酸參考面板(如圖所示):
- 唾液酸參考面板
- DMB染料(1,2-二氨基-4 ,5-亞甲基二氧基苯.HCl )
- 乙酸
- 巰基乙醇在乙酸
- 連二亞硫酸鈉(還原劑)中
通常,每組可以標記多達15個獨立的分析樣品。
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