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詳述紫外分光光度計測DNA濃度的方法

時間:2017/8/18閱讀:11099
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紫外分光光度計如何來測DNA濃度呢?以下將由上海旦鼎技術(shù)人員為您詳細講解,歡迎瀏覽以下詳細內(nèi)容!

將待測DNA溶液作適當(dāng)稀釋,選用光程為0.5cm的石英比色杯,在紫外分光光度計上測定OD260和OD280的值,按以下公式計算DNA濃度。

DNA濃度(ng /µL)=OD260×50×稀釋倍數(shù)

當(dāng)OD260/OD280< 1.8,表示蛋白質(zhì)含量較高

當(dāng)OD260/OD280> 2.0,表示RNA含量較高

當(dāng)OD260/OD280=1.8~2.0,表示DNA較純

TE緩沖液:10mM Tris-HCl(pH 8.0);1mM EDTA(pH 8.0)

CTAB提取緩沖液:100mM Tris-HCl(pH=8.0),20mM EDTA,1.4M NaCl,2%CTAB,2%ß-巰基乙醇

1×TBE緩沖液:Tris 10.8g、硼酸5.5g、EDTA(0.5M,pH8.0) 4mL,加H2O至1000mL

10×上槽緩沖液:Tris108g、硼酸55g、EDTA(1M,pH8.0)20mL,加H2O至1000mL,稀釋10倍使用

下槽緩沖液:Tris 54g、無水NaAc 205g、硼酸27.5g、EDTA(0.5M,pH8.0)20mL,加H2O定溶至1000mL,稀釋5倍使用Loading buffer:甲酰胺49mL、EDTA(0.5M,pH8.0)1mL、溴酚藍0.125g、二甲苯氰0.125g,混合備用

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