賽默飛色譜及質譜
新型離子交換色譜柱在pH梯度下檢測 不同類型的雙特異性抗體
檢測樣品:藥物
檢測項目:雙特異性抗體
方案概述:本文使用新型離子交換色譜柱ProPac Elite WCX 5 μm 4.0mmX150 mm色譜柱和CX- 1Buffer緩沖液,進行pH梯度高分辨率分析非對稱型雙特異性抗體和對稱型的IgG類抗體,使用MAbPac SCX-10 RS 5um 4.6 mmX50 mm色譜柱和CX-1 Buffer緩沖液。
雙特異性抗體作為一類雙靶點藥物,是近年來熱門的研發領 域之一,因生產工藝的差異使得其在電荷異構體分析中更具有 挑戰性,常規的鹽梯度方法很難較好的分離出酸堿變異體,本 文使用商品化的CX-1 Buffer在弱陽離子交換柱ProPac Elie WCX 和強陽離子交換柱MAbPac SCX-10 RS 柱子上可以實現較好的 分離,且該方法只需要將流動相稀釋10倍,或者添加少量的 NaCl就可以實現較好的分離。本文中研究的非對稱IgG型雙抗, 對稱IgG型雙抗和片段型雙抗在該方法下都可以實現酸堿變異 體的較好的分離,是一種快速方便的雙特異性抗體電荷異構體 分析平臺方法。該方法為雙特異性抗體的表征和質量控制提供 了新的解決方案。
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