美德聲人尿液Dkk3腎臟生物標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒

美德聲提供ReFiNE® Dkk3 ELISA 是一種酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 （ELISA），用于定量檢測(cè)人尿液樣本中的 Dickkopf-3 （DKK3）。該檢測(cè)是一種體外診斷方法，旨在供專業(yè)人員在實(shí)驗(yàn)室環(huán)境中使用。該檢測(cè)有助于診斷急性和/或慢性進(jìn)行性腎損傷。

ReFiNE® Dkk3 - 腎臟的“肌鈣蛋白”和進(jìn)行性腎損傷的生物標(biāo)志物 Dickkopf-3 （DKK3） 是 Wnt 信號(hào)通路調(diào)節(jié)劑家族的成員 [1]，已被確定為源自腎小管上皮細(xì)胞的應(yīng)激誘導(dǎo)的腎纖維化調(diào)節(jié)因子 [2]。DKK3 的基因缺失、抗體介導(dǎo)的阻斷和腎小管上皮細(xì)胞特異性消除減少了各種CKD【Chronic Kidney Disease慢性腎臟病】 小鼠模型中的腎小管間質(zhì)纖維化，從而保留了腎功能 [2]。從機(jī)制上講，DKK3 缺陷導(dǎo)致病理?xiàng)l件下腎小管上皮細(xì)胞中經(jīng)典 Wnt/?-catenin 信號(hào)傳導(dǎo)減少，伴隨著受損腎臟中抗纖維化炎癥反應(yīng)的增強(qiáng)。已在不同類型的 CKD 患者的尿液中檢測(cè)到 DKK3 蛋白，并且與腎活檢樣本中的腎小管間質(zhì)纖維化程度呈特異性和定量相關(guān)性 [2,3]。腎小管間質(zhì)纖維化是病因不同的CKD【慢性腎臟病】 的常見病理表現(xiàn)，最終導(dǎo)致腎功能衰竭。因此，尿液中的 DKK3 可用作進(jìn)行性 CKD 的診斷標(biāo)志物。這在一大群各種原因的 CKD【慢性腎臟病】患者中得到了證實(shí)，無論腎損傷的原因如何，尿 DKK3 水平都與未來 12 個(gè)月內(nèi)腎功能（腎小球?yàn)V過率，GFR）的顯著惡化相關(guān) [3]。此外，對(duì)臨床上不明顯的腎損傷受試者的研究發(fā)現(xiàn)，即使尿液中 DKK3 濃度適度升高（作為腎小管細(xì)胞長(zhǎng)期勞損的標(biāo)志）也會(huì)增加未來急性腎衰竭和隨后腎功能進(jìn)行性喪失的風(fēng)險(xiǎn) [4]。本 ELISA 用于定量測(cè)定人尿液中的 DKK3。在這方面，它可以作為“腎小管應(yīng)力”的特定測(cè)量工具，從而量化未來腎功能喪失或CKD【慢性腎臟病】進(jìn)展的風(fēng)險(xiǎn)[3-8]。

檢測(cè)原理
ReFiNE® Dkk3 ELISA 是一種夾心 ELISA，用于定量測(cè)量人尿液中的 DKK3。微孔板的孔包被有單克隆抗人 DKK3 清道夫抗體。在第一個(gè)孵育步驟中，樣品中存在的 DKK3 與固定的捕獲抗體結(jié)合，形成第一個(gè)抗原-抗體復(fù)合物。在洗滌步驟以去除所有未結(jié)合的樣品組分后，加入用辣根過氧化物酶 （HRP） 標(biāo)記的檢測(cè)抗體。形成清道夫-抗體-抗原-檢測(cè)抗體復(fù)合物。通過進(jìn)一步的洗滌步驟去除未結(jié)合的組分。添加酶促反應(yīng)底物（四甲基聯(lián)苯胺，TMB）后，HRP 催化無色 TMB 氧化成藍(lán)色氧化的 TMB。通過加入酸性終止液終止反應(yīng)，顏色從藍(lán)色變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與 DKK3 的濃度成正比。使用校準(zhǔn)曲線確定結(jié)果。

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